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        O-Glycoprotease
        1. 貨號
        2. 規格
        3. 價格
        QIP-008-A
        2000U
        詢價

        產品概述

        背景:

               O-糖蛋白酶(O-Glycoprotease)序列來自Akkermansia muciniphila,重組表達于E.coli,C端帶6×His標簽。O-糖蛋白酶是一種O-糖蛋白特異性內切蛋白酶,可催化天然黏蛋白型O-糖基化蛋白中與O-聚體直接相鄰的肽鍵的水解。

               O-糖蛋白酶作為內切蛋白酶,高度特異性地在絲氨酸或蘇氨酸的O-聚糖N端消化蛋白質。這就產生了N端攜帶O-糖鏈的糖肽,并使O-糖鏈分析、O-糖鏈定位和O-聚糖位點測定成為可能。

               O-糖蛋白酶對唾液酸化的核心1 O-聚糖活性最高,對核心3 O-糖基化和α 2,3唾液酸化核心1的糖蛋白活性較差,與Tn抗原、核心2和α2,6唾液酸化核心1的O-聚糖位點無活性。僅僅只有N-聚糖修飾時,此酶不酶切。該酶對帶有或不帶有唾液酸的O-聚糖蛋白均有活性,在去唾液酸的O-聚糖蛋白上活性更高。此酶在pH 5.5-7.5之間均能保持較高活性,能耐1M NaCl,但對EDTA高度敏感(0.5mM EDTA),并且被Zn2+部分抑制。

        產品包裝:

               Rhinogen?O-糖蛋白酶(O-Glycoprotease)包裝規格如下:

        目錄號
        規格
        制劑
        QIP-008
        2000U
        凍干于20mM TBS,pH7.6中,不添加防腐劑

        配套試劑:

               配套提供的Rhinogen? α2-3,6,8,9 Neuraminidase(EDTA-free)包裝規格如下:

        目錄號
        規格
        制劑
        QPF-012
        0.6U/30μl
        50mM NaCl,20mM Tris-HCl(pH7.5 at 25°C)

               配套提供的試劑如下:

        目錄號
        試劑
        成分
        EB10
        10×Glyco緩沖液3
        200mM Tris,pH6.8

        產品來源:

               RhinogenO-糖蛋白酶序列來源于Akkermansia muciniphila,重組表達于E. coli,理論分子量約42KD,C端帶6×His標簽。

        產品質量:

               1. 高穩定性:每批產品都經過嚴格的質量控制,以實現產品批間穩定性;

               2. 高純度:通過SDS-PAGE檢測,O-糖蛋白酶純度≥90%,α2-3,6,8,9 Neuraminidase純度≥95%。

               

        產品特性:

               O-糖蛋白酶(O-Glycoprotease)是一種O-糖蛋白特異性內切蛋白酶,可催化天然黏蛋白型O-糖基化蛋白中與O-聚體直接相鄰的肽鍵的水解,位點在O-糖基化絲氨酸和蘇氨酸殘基的N端。 

        酶活定義:

               與α2-3,6,8,9Neuraminidase(EDTA-free)搭配使用,在20mM Tris-HCl,pH6.8條件下,37℃孵育2小時,1單位酶(1U)可消化1μg糖蛋白(TNFR)的≥90%,通過SDS-PAGE確認。 

        儲存條件:

               采用冰袋運輸,長期儲存請置于-20℃,重懸后2-8℃可保存1個月。避免反復多次凍融。

        應用:

               1. O-糖基化分析;

               2. O-聚糖譜;

               3. O-聚糖位點測定。

        相關下載

        常見問題

        已知的O-糖蛋白酶抑制劑有哪些?
        O-糖蛋白酶是一種金屬蛋白酶,因此對螯合劑(如EDTA)高度敏感,濃度>5mM會導致酶的完全抑制。ZnCl2也部分抑制O-糖蛋白酶活性。

        O-糖蛋白酶是否可以和唾液酸酶合用?
        是的,與唾液酸酶結合使用,可用于去唾液酸化和消化O-糖基化蛋白質,提高O-糖蛋白酶酶切效率。

        必須要去除唾液酸嗎?
        在唾液酸存在下,O-糖蛋白酶的活性顯著降低,因此我們建議使用唾液酸酶去除唾液酸?;驅δ臉悠穱L試使用和不使用唾液酸酶條件下對比消化,以評估您的特定樣品是否有必要去除唾液酸。

        是否需要樣品處于天然折疊狀態?還是要進行變性處理?
        如果消化不充分,可能是由于樣品的O-聚糖存在空間位阻,酶無法到達導致的。在這種情況下,我們建議嘗試以下工作流程:還原、變性、羧甲基化、置換緩沖液,然后使用O-糖蛋白酶和唾液酸酶進行消化。

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